材料

病料：在无菌操作条件下取疑似病猪的肺脏、胸膜、胸腹腔积水、心包积液、心血、关节液等。

培养基：巧克力琼脂平板或胰蛋白胨大豆琼脂。

生化试验试剂：氧化酶、甘露醇、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、糖、脲酶和伯胶糖等，均购自长沙金标生物有限公司。

药敏试纸：氟苯尼考、泰妙菌素、头孢菌素、丁胺卡那霉素、氟甲砜霉素、头孢噻肟、红霉素、克林霉素、庆大霉素、环丙沙星、恩诺沙星、链霉素、土霉素,均购自长沙金标生物有限公司。

方法及结果

1 病理变化观察

剖检病死猪，发现胸腔内有大量淡红色液体、纤维性渗出物。肺脏呈纤维素性胸膜肺炎，肺肿大暗紫红色，表面覆有纤维素性渗出物。支气管内有淡红色泡沫样渗出物。心包积液。腹腔内有大量透明黄褐色渗出液，有的呈胶胨状凝块。全身淋巴结肿大，暗红色。

2 触片镜检

取发病猪的肺组织、心血、胸水和腹膜面涂片，革兰氏染色，镜检可见革兰氏阴性的细小杆菌，个别两极球杆状革兰氏阴性菌。

3 细菌分离培养

无菌取发病猪的肺脏、腹膜、胸水和心血划线接种TSA平板，置37℃，5%CO2培养箱培养48h，出现无色、透明、湿润、光滑、边缘整齐的针头大小菌落，镜检可见大小不一、形态有细长、丝状的革兰氏阴性杆菌。接种无NAD的TSA不生长。而后挑取单个菌落，再进行纯培养。

4 生化试验

挑取纯化菌落接种于氧化酶、甘露醇、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、核糖、脲酶和伯胶糖等生化鉴定管中，同时加入001%的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸5微升，置于37℃5%的CO2培养箱培养48h，观察结果如下：

5 药敏试验

将细菌TSA纯培养物，吸取200微升均匀涂布于TSA平板上，纸片法进行药敏试验，置37℃5%的CO2培养箱中培养48h，测量抑菌环直径并判定结果。该菌对氟苯尼考、泰妙菌素、氟甲砜霉素、头孢菌素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟高敏，对红霉素、克林霉素、庆大霉素、环丙沙星、恩诺沙星、链霉素、土霉素低敏。

讨论与防治建议：

当前猪场普遍滥用抗生素使得副猪嗜血杆菌在病料中分离率比较低，要求患猪未使用抗生素治疗并且在剖杀后6小时内进行细菌分离。而且该菌对营养要求苛刻，在巧克力培养基上培养48h生长也较差。一般该菌的分离应采用含NAD、酵母浸出液和10%马血清的TSA培养基。

防治建议——加强日常管理、必要时做好免疫：

加强日常管理，做好环境卫生的消毒工作对预防细菌病有重要意义。一般猪场无本病发生时，要做好药物保健措施，不建议免苗。在本病常发场，建议使用正规厂家的疫苗做好免疫程序。

预测与验证

通过加强日常管理和做好免疫工作，可以有效降低副猪嗜血杆菌病的发病率。欢迎广大养殖户用实际体验验证这一观点。